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一、沃特世液相色譜檢測(cè)儀是如何實(shí)現(xiàn)、快速、靈敏這些特點(diǎn)的?
解答：氣相色譜理論和技術(shù)上的成就為液相色譜的發(fā)展創(chuàng)造條件，從它的、高速和高靈敏渡得到啟發(fā)，采用5一10四微粒出定相以提高柱效，采用高壓泵加快液體流動(dòng)相的流速;設(shè)計(jì)高靈敏度、死體積小的紫外、熒光等檢測(cè)器，提高檢測(cè)靈敏度，克服經(jīng)典液相色譜曲缺點(diǎn)，從而達(dá)到、快速、靈敏。
二、簡(jiǎn)述沃特世液相色譜檢測(cè)儀中引起色譜峰擴(kuò)展的主要因素，如何減少諳帶擴(kuò)張、提高柱效?
解答：液相色譜中引起色諾峰擴(kuò)展的主要因素為渦流擴(kuò)散、流動(dòng)相傳質(zhì)、停留流動(dòng)相傳質(zhì)及柱外效應(yīng)。
在液相色譜中要減小譜帶擴(kuò)張，提高柱效，要減少續(xù)料顆粒直徑，減小境料孔穴深度，提高裝填的均勻性，采用低粘度溶劑作流動(dòng)相，流速盡可能低，同時(shí)要盡可能采用死體積較小的進(jìn)樣器、檢測(cè)器、接頭和傳輸管線等。
三、流動(dòng)相為什么要預(yù)先脫氣?常用的脫氣方法有哪幾種?
解答：流動(dòng)相中溶解氣體存在以下幾個(gè)方面的害處，氣泡進(jìn)入檢測(cè)器，引起光吸收成電信號(hào)的變化，基線突然跳動(dòng)，干擾檢測(cè);溶解在溶劑中的氣體進(jìn)入色譜柱時(shí)，可能與流動(dòng)相或固定相發(fā)生化學(xué)反應(yīng);溶解氣體還會(huì)引起某些樣品的氧化降解.對(duì)分離和分析結(jié)果帶來誤差。因此，使用前必須進(jìn)行脫氣處理。常用的脫氣法有以下幾種：(1)加熱脫氣法;(2)抽吸脫氣法;(3)吹氦脫氣法;(4)超聲波振蕩脫氣法。
四、對(duì)液相色譜流動(dòng)相有何要求?
解答：用作液相色譜流動(dòng)相的溶劑，其純度和化學(xué)特性必須滿足色譜過程中穩(wěn)定性和重復(fù)性的要求。對(duì)樣品要有一定的溶解能力，粘度小，化學(xué)穩(wěn)定性好，避免發(fā)生不可逆的化學(xué)吸附。溶劑應(yīng)與檢測(cè)器相匹配，不干涉所使用檢測(cè)器的工作，制備色譜的溶劑應(yīng)不干擾對(duì)分離各組分的回收。除此以外，選擇的溶劑對(duì)所給定的樣品組分具有合適的極性和良好的選擇性。
五、與氣相色譜法相比沃特世液相色譜檢測(cè)儀有哪些優(yōu)點(diǎn)和不足?
解答：氣相色譜的分析對(duì)象是在校溫下具有一定的揮發(fā)性、對(duì)熱穩(wěn)定購物質(zhì)。因此它只限于分析氣體和沸點(diǎn)低的化合物或揮發(fā)性的衍生物。而沃特世液相色譜檢測(cè)儀由于以液體作為流動(dòng)相，只要被分析的物質(zhì)在選用的流動(dòng)相中有一定的按解度，便可以分析，所以適用性廣，不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，特別適合于那些沸點(diǎn)高、極性強(qiáng)、熱穩(wěn)定性差的化合物，例如，生化物質(zhì)和藥物、離子型化合物、熱穩(wěn)定性差的天然產(chǎn)物等。在目前已知的有機(jī)化臺(tái)物中，
只有20%樣品可不經(jīng)化學(xué)處理而能滿意地用氣相色譜分離，80%的有機(jī)化合物要用液相色譜分析。氣相色譜中流動(dòng)相是惰性的，它對(duì)組分沒有作用力，僅起運(yùn)載作用、而液相色譜的流動(dòng)相不僅起運(yùn)載作用，而且流動(dòng)相對(duì)組分有一定親合力，可以通過改變流動(dòng)相種類和組成提高分離的選擇性，另外可作流動(dòng)相的化合物多，選擇余地廣。
與氣相色譜相比，沃特世液相色譜檢測(cè)儀的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是樣品的回收比較容易，只要開口容器放在柱子末端，就可以很容易地將所分離的各組分收集。回收是定量的，可以用來提純和制備具有足夠純度的單一物質(zhì)。液相色譜不足的是，日前檢測(cè)器的靈敏度不及氣相色譜。必須特別注意“柱外效應(yīng)”對(duì)柱效率及色譜分離的影響。
以上五個(gè)問題是客戶經(jīng)常會(huì)問到的，如果您在使用沃特世液相色譜檢測(cè)儀時(shí)，還遇到其他問題，咨詢!
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